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激光共聚焦熒光顯微鏡 活體熒光物質(zhì)檢查

更新時(shí)間:2023-08-10      點(diǎn)擊次數(shù):620

激光共聚焦熒光顯微鏡 活體熒光物質(zhì)檢查

激光共聚焦顯微鏡,簡(jiǎn)稱CLSM(Confocal Laser Scanning Microscopy),是一種利用激光共振效應(yīng)進(jìn)行成像的顯微鏡。它通過(guò)使用激光束掃描樣品的不同層面,將所得到的圖像合成成一幅清晰的三維圖像。與傳統(tǒng)顯微鏡相比,激光共聚焦顯微鏡具有更高的分辨率和更強(qiáng)的穿透能力,可以觀察到更加細(xì)微的結(jié)構(gòu)和更深層次的物質(zhì)。

在活體熒光物質(zhì)的檢查中,激光共聚焦顯微鏡發(fā)揮了重要的作用。通過(guò)標(biāo)記活體細(xì)胞或組織的特定結(jié)構(gòu)或分子,激光共聚焦顯微鏡可以實(shí)時(shí)觀察到這些結(jié)構(gòu)或分子的活動(dòng)和分布情況。

在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,它可以用于觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和死亡過(guò)程,研究細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和分子交互作用等。在藥物研發(fā)中,它可以用于觀察藥物在活體細(xì)胞或組織中的分布情況,評(píng)估藥物的療效和毒性。此外,在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域,激光共聚焦顯微鏡可以用于觀察神經(jīng)元的活動(dòng)和連接,揭示大腦的工作機(jī)制。

激光共聚焦顯微鏡NCF950(2023)1 

NCF950激光共聚焦顯微鏡場(chǎng)熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn):

l 能夠通過(guò)熒光標(biāo)本連續(xù)生產(chǎn)薄(0.5至1.5微米)的光學(xué)切片,厚度范圍可達(dá)50微米或更大。(主要優(yōu)點(diǎn))

l 控制景深的能力。

l能夠從樣品中分離和收集焦平面,從而消除熒光樣品通常看到的焦外“霧霾",非共焦熒光顯微鏡下無(wú)法檢測(cè)到。(最重要的特點(diǎn))

l  從厚試樣收集連續(xù)光學(xué)切片的能力。

l 通過(guò)三維物體收集一系列圖像,用于二維或三維重建。

l收集雙重和三重標(biāo)簽,精確的共定位。

l 用于對(duì)在不透明的圖案化基底上生長(zhǎng)的熒光標(biāo)記細(xì)胞之間的相互作用進(jìn)行成像。

l  有能力補(bǔ)償自發(fā)熒光。

耐可視共聚焦與尼康共聚焦成效效果圖對(duì)比 

耐可視共聚焦成像效果圖                                                          尼康共聚焦成成像效果圖

NCF950激光共聚焦顯微鏡應(yīng)用,共聚焦顯微鏡在以下研究領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛:

1、細(xì)胞生物學(xué):細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、流動(dòng)性、受體、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細(xì)胞凋亡;

2、生物化學(xué):酶、核酸、FISH、受體分析

3、藥理學(xué):藥物對(duì)細(xì)胞的作用及其動(dòng)力學(xué);

4、生理學(xué):膜受體、離子通道、離子含量、分布、動(dòng)態(tài);

5、遺傳學(xué)和組胚學(xué):細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、成熟變化、細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達(dá)、基因診斷;

6、神經(jīng)生物學(xué):神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運(yùn)輸和傳遞;

7、微生物學(xué)和寄生蟲(chóng)學(xué):細(xì)菌、寄生蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu);

8、病理學(xué)及病理學(xué)臨床應(yīng)用:活檢標(biāo)本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷;

9、生物學(xué)、免疫學(xué)、環(huán)境醫(yī)學(xué)和營(yíng)養(yǎng)學(xué)。

NCF950激光共聚焦顯微鏡配置

NCF950激光共聚焦配置表

激光器

激光405 nm、488 nm、561 nm、640 nm

探測(cè)器

波長(zhǎng):400-750nm,探測(cè)器:3個(gè)獨(dú)立的熒光檢測(cè)通道;1個(gè)DIC透射光檢測(cè)通道

掃描頭

最大像素大小:4096 x 4096 掃描速度:2 fps(512 x 512像素,雙向),18 fps(512 x 32像素,雙向),圖像旋轉(zhuǎn): 360°

掃描模式

X-T, Y-T, X-Y, X-Y-Z, X-Y-Z-T

針孔

無(wú)級(jí)變速六邊形電動(dòng)針孔;調(diào)節(jié)范圍:0-1.5毫米

共焦視場(chǎng)

φ18mm內(nèi)接正方形

圖像位深

12bits

配套顯微鏡

NIB950全電動(dòng)倒置顯微鏡

光學(xué)系統(tǒng)

NIS60無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)(F200)

目鏡(視野)

10×(25),EP17.5mm,視度可調(diào)-5~+5,接口Φ30

觀察鏡筒

鉸鏈?zhǔn)饺坑^察鏡筒,45度傾斜,瞳距47-78mm,目鏡接口Φ30,固定視度;1)目/攝切換:(100/0,50/50,0/100);2)目視/關(guān)閉目視/可調(diào)焦勃氏鏡

NIS60物鏡

10×復(fù)消色差物鏡,NA=0.45 WD=4.0 蓋玻片=0.17

20×復(fù)消色差物鏡,NA=0.75 WD=1.1 蓋玻片=0.17

60×半復(fù)消色差物鏡,NA=1.40 WD=0.14 蓋玻片=0.17 油鏡

100×復(fù)消色差物鏡,NA=1.45 WD=0.13 蓋玻片=0.17 油鏡

物鏡轉(zhuǎn)換器

電動(dòng)六孔轉(zhuǎn)換器(擴(kuò)展插槽),M25×0.75

聚光鏡

6孔位電動(dòng)控制:NA0.55,WD26;相襯(10/20,40,60選配)

DIC(10X,20X/40X)選配.空孔

照明系統(tǒng)

透射柯拉照明,10W LED照明;

落射照明:寬場(chǎng)光纖照明
6孔位電動(dòng)熒光轉(zhuǎn)盤(pán)(B,G,U標(biāo)配);電動(dòng)熒光光閘;

中間倍率切換

手動(dòng)1X,1.5X、共焦切換

機(jī)身端口

分光比:

左側(cè):目視=100:0;右側(cè):目視=100:0;

平臺(tái)

電動(dòng)控制:行程范圍130 mm x100 mm (臺(tái)面325 mm x 144 mm )最大速度:25mm/s;分辨率:0.1μm - 重復(fù)精度:3μm。機(jī)械可調(diào)樣品夾板

調(diào)焦系統(tǒng)

同軸粗微動(dòng)升降機(jī)構(gòu),行程:焦點(diǎn)上7下2;粗調(diào)2mm/圈,微調(diào)0.002mm/圈;可手動(dòng)和電動(dòng)控制,電動(dòng)控制時(shí),最小步進(jìn)0.01um;

DIC插板

10X,20X,40X插板;可放置于轉(zhuǎn)換器插槽;選配

控制

搖桿,控制盒,USB連接線

軟件

軟件:NOMIS Advanced C
圖像顯示/圖像處理/分析
2D/3D/4D圖像分析,經(jīng)時(shí)變化分析,三維圖像獲得及正交顯示,圖像拼接,多通道彩色共聚焦圖像

 

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